公告:豬第二型環狀病毒重組蛋白之發展
詳細內容:豬瘟研究組 王 ? 助理研究員  第二型豬環狀病毒(porcine circovirus type 2; PCV2),為引起豬離乳後多系統消耗性綜合症(postweaning multisystemic wasting syndrome;PMWS) 之主要病原。 最主要特徵為患豬體重漸進性喪失,呼吸症狀等。肉眼及組織病變有肉芽腫性間質性肺炎(granulomatous interstitial pneumonia),淋巴結病(lymphadenopathy),及淋巴球性肉芽腫性肝炎及腎炎。 除此之外目前相關報告指出,PCV2與豬隻皮膚炎腎病症候群(porcine dermatitis nephropathy syndrome; PDNS)、先天性震顫(congenital tremors; CT)、豬呼吸道綜合症(porcine respiratory disease complex; PRDC)、增殖性及壞死性肺炎(proliferative and necrotising pneumonia; PNP)、豬隻流死產均有關、 甚至是無明顯臨床症狀豬隻之組織亦可檢測到PCV2之存在。本實驗萃取台灣豬第二型環狀病毒分離株之病毒核酸,利用聚合?鏈反應(PCR)增幅ORF2基因全長片段。再將此ORF2基因片段植入表現載體中, 經篩選後,選擇嵌有ORF2基因之表現質體,藉將此表現質體轉染至真核細胞內進行重組蛋白表現。另外將含較高抗原性之ORF2中、後區域片段基因植入表現載體中, 經篩選後選擇嵌有ORF2片段基因之表現質體,並將此表現質體轉型至大腸桿菌中表現,結果二者成功表現並純化出重組蛋白,而純化量約10mg / L,所得之重組蛋白未來亦將進行各項相關試驗研究。 瘟野外毒及LPC疫苗毒皆可增幅,應用這四對引子,很容易區別送檢病例是豬瘟野外毒或LPC疫苗毒。
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